一个精子穿入一个卵子的细胞质形成受精卵,这个受精卵叫合子(zygote)。受精卵虽然是由一个精子和一个卵子结合形成,但生育年龄的男性在一次正常的交合后,生育年龄的女性的一个卵子需要和射出的精液中难以记数的精子在输卵管相遇才能完成受精过程。仅一个精子和一个正常的卵子成功地自然受精几乎是不可能的事。胚胎学家尝试注射哺乳动物的精子进入卵子受精的研究已达数十年之久,这为人的精子注射成功奠定了一定的基础。1992年,比利时布鲁塞尔大学的几位科研人员,在“手术刀”杂志发表了.他们轰动一时的文章,他们在文章中宣布,在显微镜下将人的一个精子直接注射到一个卵子中,然后将其重新放回妇女的子宫并受孕成功。由此,ICSI(intracytoplasmic:sperm injection)被公认为是当今治疗男性不育的非常有价值的方法。自从1992年以来,世界上已诞生了数万计的ICSI婴儿。中国各大城市的IVF(in vitro fertilization)中心也已普遍应用此项技术。
一、ICSI的适应证
常规IVF要求精液中的含精量不能低于5×106/ml,运动力强和形态正常的精子大约要在30%以上。任何因为精子数量和质量上不合乎做常规IvF者,都可实施ICSI手术治疗。男女双方术前检查各项指标基本正常而又多年不能自然怀孕者,可用豚鼠卵做精子穿透实验,此项穿透实验阴性者越过常规IVF直接选择做ICSI手术。对那些男性每次射出的精液中精子数量很多(甚至有上亿精子),但因为精子功能问题无法完成受精过程也应该选择做ICSI手术。
根据精子的来源,ICSI可分为常规ICSI、附睾穿刺取精ICSI及睾丸活检ICSI。如果睾丸活检实验也找不到精子而有精圆细胞,可考虑做ROsI(round sperm iniection)。可以说,ICSI手术基本上解决了男性不育的问题。但究竟什么样的遗传性疾病男性病人不宜做ICSI手术(除去医疗费用的因素外),是社会伦理讨论的课题。
二、常规IcSI
(一)手术前一天的准备工作
手术前一天要准备ICSI注射皿、清洗皿和培养皿,并预热10ml HTF‘培养液全部置于37℃,5%CO,的培养液中过夜。
1.ICSI注射皿ICSI注射皿使用100×15film培养皿的盖子(F'alconl029),中间滴放50ml PVP(IRvINE SCIETIFIC等公司生产),周围可放4~6滴50ml HTF+10%SSS的培养液,上覆盖矿物油(也可向公司订购特制的ICSI皿)。
2.清洗皿 准备两个Organ培养皿(Falton3037),Organ培养皿是一种中间凹周围有槽围绕的专门为培养卵子设计的培养皿,中间放满HTF+10%SSS的培养液,周围槽中仅放HTF培养液供初步清洗和保持湿度之用。
3.培养皿用小的Falcon培养皿,内放数个培养液滴,每滴约50ral HrrF+10%SSS的培养液,上面覆盖矿物油。
清除卵丘细胞的玻璃细针管可在手术前一天或当天早晨用消毒的巴斯德玻璃管在酒精灯上拉制,拉成大约150bUm和120Um两种口径的细针管备用(可向Diagnostics,inc订购从100~tm到270fUm不同口径的巴斯德玻璃管,产品号码STRIPPER l
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